Epstein-Barri ja tsütomegaloviiruse serodiagnostika. Maire Tehvre

Transcription

1 Epstein-Barri ja tsütomegaloviiruse serodiagnostika Maire Tehvre

2 EBV Epstein-Barri viirus e. HHV-4 (Human herpesvirus 4)

3 EBV Herpesviiruste perekonnast. Üks tavalisemaid viirusi inimesel. Esineb kogu maailmas. Enamus inimesi infitseeritud, kulg tihti asümptomaatiline, kuid harilikult põhjustab infektsioosset mononukleoosi (glandular fever- näärmete palavik)

4 EBV ajalugu 1889 Saksa arst Pfeiffer kirjeldas haigust, mida iseloomustab palavik, lümfadenopaatia, halb enesetunne, hepatosplenomegaalia alguses kirjeldati hulgaliselt sarnaseid haigusjuhte.

5 EBV ajalugu 1932 Paul Bunnell tuvastas seerumist heterofiilsed antikehad ägeda infektsioosse mononukleoosi ajal Michael Epstein ja Yvonne M.Barr kirjeldasid esimest inimese tuumori viirust Burkitti lümfoomi rakuliiniil. Hiljem hakati nimetama Epstein-Barri viirus.

6 EBV morfoloogia Struktuur tüüpiline herpesviiruste perekonnale. Kuulub gammaherpesviiruste alaperekonda.

7 EBV levik Süljega (kissing disease) Oraalne sekretsioon Veretooted, siirdatud organid Intrauteriinselt Arengumaades % 3-6a. lastest infitseeritud. Kliiniliselt kerge kuluga. Arenenud maades esineb hilisemas vanuses (10-30a). Kliiniliselt mononukleoosi sündroom.

8 EBV kliiniline pilt Lastel: mittespetsiifilised infektsioonid, pikaleveninud subfebriliteet, lümfadenopaatia, köha, nohu, farüngiit. Infektsioosne mononukleoos: halb enesetunne, väsimus, lümfadenopaatia, tonsillofarüngiit, hepatosplenomegaalia, kõhuvalu EBVga seotud tuumorid: B-rakuline lümfoom Burkitt i lümfoom Nasofarüngeaalkartsinoom Leiomüosarkoom Komplikatsioonid hepatiit, trombotsütopeenia, autoimmuunhaigus, Reye sündroom

9 EBV-milleks testida? - Inf. mononukleoosi sümptomid, kui IgM on negatiivne - kas gripilaadsed sümptomid on põhjust. EBV-st - kui maksahaiguse korral negatiivne hepatiidi seroloogia - eelneva EBV nakkuse kindlaks tegemine - antikehade konts. jälgimine

10 EBV diagnostilised testid Infektsioosne mononukleoos Paul-Bunneli test Mono Spot test kiistestid heterofiilsete antikehade määramiseks posit. varases EBV staadiumis negat. hilises staadiumis 10% lastest heterofiilsed antikehad puuduvad EBV infektsioon Kaudne immuunfluorestsents

11 EBV diagnostilised testid Mikroskoopia slaid-test VCA, EBNA ja EA vastaste antikehade määramiseks Tundlik, spetsiifiline Vajalik vilunud töötaja Fluorestsentsmikroskoobi olemasolu Manuaalne dokumentatsioon, subjektiivsus Bio-chip slaid-test kõik vajaminevad antigeenid ühel slaidil Kõrge töökoormus, manuaalne dokumentatsioon, subjektiivsus

12 EBV diagnostilised testid CLIA kemiluminestsents immuunanalüüs luminomeetriline EIA test ak-de määramiseks tundlik, spetsiifiline täielikult automatiseeritud käsitsi tööd vähe, automatiseeritud andmete edastamine ELISA kolorimeetriline antikehade määramine tundlik, spetsiifiline teostatakse manuaalselt või automatiseeritult

13 EBV diagnostilised markerid

14 EBV markerid EA IgM /IgG varajase antigeeni vastased antikehad ilmuvad haiguse ägedas faasis. IgG muutub mittemõõdetavaks 3-6 kuu pärast VCA IgM ilmub inf. alguses. Kaob 4-6 nädala pärast. VCA IgG max. 2-4 nädalal, aeglaselt langeb. Püsib kogu elu. EBNA IgG ilmuvad aeglaselt 2-4 kuud. Püsivad kogu elu.

15 EBV diagnostiline algoritm

16 EBV diagnostiline algoritm

17 EBV diagnostiline algoritm

18 CMV tsütomegaloviirus

19 CMV Kuulub herpesviiruste perekonda. Kahespiraalne DNA viirus. Inimestel küllalt levinud infektsioon. Haiguse kulg kerge või asümptomaatiline. Infektsioonid rasedatel, vastsündinutel ja immuunsupresseeritud inimestel võivad põhjustada olulisi meditsiinilisi riske. Üsasisene infektsioon tüsistusena vaimne alaareng, koorioretiniit, kuulmise langus, neuroloogilised probleemid.

20 CMV Võib esineda primaarinfektsioon reinfektsioon eksogeense viirusega reaktivatsioon latentsest viirusest CMV IgG antikehad ei pruugi tagada kaitset korduva haigestumise eest. Nakatumine: kongenitaalne infektsioon ema viirus nakatab loodet läbi platsenta. Võib põhjustada enneaegselt-, surnult sündivust.

21 CMV nakatumine Omandatud infektsioon - vastsündinu nakatumine sünnitusteede läbimisel või hilisemas elus otsesel kokkupuutel teiste inimeste sekreetidega. Erilist tähelepanu pöörata immuundefitsiitsetele patsientidele, eriti organtransplanteeritud haigetele. CMV esikohal viiruste transplantatsiooni patoloogias. Eluohtlikud tüsistused.

22 CMV diagnostika Viiruse isoleerimine pp65 viiruse varase antigeeni või CMV-DNA määramine ELISA uuring CMV IgM, IgG antikehade määramine Kliinilise vere uuring

23 CMV diagnostika Immuunhistokeemiline uuring. Poolkvantitatiivne. CMV persisteerub leukotsüütides. Peamine viiruse maatriksi valk on pp65 antigeen, mis ekspresseerub juba CMV nakkuse varases staadiumis. Sobib hästi varaseks diagnoosimiseks, kui CMV antikehade määramine on veel ebatäpne. CMV DNA PCR meetod. Kiire, hea tundlikkusega. Reaalaja PCR võimaldab määrata ka viiruse hulka veres.

24 Kui CMV IgM positiivne Kas positiivne IgM on värske infektsiooni tunnus või on jääk IgM? Kas positiivne IgM on ristreaktsioon? Millal on infektsioon omandatud? Positiivne CMV IgM edasine uuring

25 CMV IgM, IgG Acute stage Sub-acute Chronic / latent stage 2000 IgG IU/ml Early acute Acute IgG Ratio IgM IgM Cutoff IgG Cutoff IgM Exposure Months

26 CMV algoritm

27

28

29 Kokkuvõte Kuldne standard CMV seroloogias puudub Madala aviidsusega tulemused alati ei tõesta primaarinfektsiooni. Ristreaktsioonid EBV ja RF-ga. CMV ja EBV eristamine lisauuringutega Positiivseid CMV IgM tulemusi alati täiendavalt edasi uurida, et täpselt diagnoosida ema CMV infektsiooni ja minimaliseerida mittevajalikke amniotsenteese.

30 TÄNAN TÄHELEPANU EEST! ÜHISELT ABIKS!